[CELLiST] 폴록사머 188 (P188)의 첨가가 mAb 를 생성하는 CHO 세포 배양에 미치는 영향

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작성자 ajinomo 조회 4,804 작성일 23-10-30 17:27

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Poloxamer 188 (P188)의 첨가가 mAb 를 생성하는 CHO 세포 배양에 미치는 영향 


Poloxamer 188 (P188, Pluronic F-68) 은 세포 배양 배지에 널리 사용되어 유체 역학적 압력으로부터 세포를 보호하고 공정 성능 전체(1,2)에 중요한 역할을 하는
원료입니다. 이전 연구에서는 부가적인 전단력으로부터 보호가 필요할 경우 (예를 
들어, 세포주가 민감하거나 또는 높은 전단력으로 배양 공정을 설계한 경우),
Poloxamer 농도 (최대 5 g/L)를 증가 시켜도 
세포 배양 성능 및 제품 품질(2)에 영향을 미치지 않음을 보여주었습니다.


여기서는 Poloxamer 188 ('Kolliphor®, Sigma-Aldrich')의 다양한 농도(0-2 g/L)가 세포 배양 성능과 생산성에 미치는 영향을 보여드립니다. 이러한 결과는 높은
농도의 Poloxamer 188 에 대해 Viable Cell Density (VCD)의 소폭 증가를 관찰할 수 
있지만 IgG 생산에 큰 영향이 없음을 보여줍니다. 따라서 최적의 배양 성능을 위해서는 약 1 g/L Poloxamer 188 를 첨가하는 것을 권장 드립니다.


아래 그래프는 항체를 생성하는 CHO-DG44 세포 라인에서 VCD, Viability 및 IgG titer 에 대한 Poloxamer 188 의 영향을 보여줍니다.


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Note: 이전에는 Poloxamer 188 의 lot-to-lot variation 으로 인해 파우더형 세포 배양 배지(3, 4)에 원료로 포함하기가 어려웠습니다. 그러나 최근 개선된
기술로 일관된 성능을 유지할 수 있게 되었으며, 아지노모도제넥신의 최신 CHO 세포 
미디어인 BASAL4P 에는 생물학 제조 시 전단 응력을 줄이기 위해 특별히 설계된
고순도 Poloxamer 188 인 Kolliphor® P 188 
Bio 가 포함되어 있습니다.


References:

1) Guzniczak E., et al. (2018). Impact of poloxamer 188 (Pluronic F-68) additive on cell mechanical properties, quantification by real-time deformability cytometry. Biomicrofluidics 12(4):044118.

2) Tharmalingam, T., Goudar, C. (2015). Evaluating the Impact of High Pluronic (R) F68 Concentrations on Antibody Producing CHO Cell Lines. Biotechnology and bioengineering. 112(4):832-7.

3) Peng, H., et al. (2014). Development of small scale cell culture models for screening poloxamer 188 lot‐to‐lot variation. Biotechnol Progress, 30(6): 1411-8.

4) Narayanappa , A.T., et al. (2019). A rapid cell-based assay for determining poloxamer quality in CHO suspension cell culture. BioTechniques 2019 67:3, 98-109.




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